单核细胞增生李斯特菌LadR蛋白对外排泵MdrL的调控机制研究

作者：徐雅梦; 姜晓冰^*; 于涛

来源：生物技术通报, 2018, 34(12): 166-171.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0430

• 单核细胞增生李斯特菌
• LadR蛋白
• 外排泵
• 调控

研究单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)调控子LadR对外排泵MdrL的调控作用及方式。采用同源重组技术构建ladR基因缺失菌株ΔladR;通过实时荧光定量PCR检测mdrL基因在野生株EGD-e和突变株ΔladR中的转录水平;构建重组蛋白表达菌株BL21(DE3)-ladR并纯化重组蛋白His6-LadR;通过凝胶阻滞试验检测LadR蛋白与mdrL基因启动子区域的结合活性。成功构建ladR基因缺失菌株ΔladR。与野生株EGD-e相比,突变株ΔladR中mdrL基因的转录水平提高约51倍;成功构建重组蛋白表达菌株BL21(DE3)-ladR,纯化得到浓度为1 mg/mL的重组蛋白His6-LadR;凝胶阻滞实验结果显示,重组蛋白His6-LadR可与mdrL基因的启动子区域特异性结合。Lm的调控子LadR通过与mdrL基因启动子区域特异性结合实现对外排泵MdrL的负调控。

• 出版日期2018
• 单位河南师范大学; 生命科学学院; 生命科学技术学院; 新乡学院