大黄酸对LPS刺激下RAW264.7细胞HMGB1表达的影响

作者:黄慧娜; 温泉; 雷航; 田瑞敏; 梅丽艳; 黎晖
来源:中药材, 2017, 40(06): 1439-1442.
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2017.06.044

摘要

目的:探究大黄酸对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响。方法:将培养的RAW264.7细胞分为空白对照组、模型组(LPS)、正丁酸钠阳性对照组及大黄酸低(140μmol/L)、高(210μmol/L)浓度组共5组,给药24 h后收集培养液上清并提取细胞总RNA、总蛋白。采用ELISA法检测培养液上清中HMGB1的含量;RT-PCR法检测HMGB1 mRNA表达;Western Blot检测HMGB1、HDAC3蛋白表达;免疫细胞化学共聚焦显微镜观察HMGB1定位。结果:与LPS组比较,大黄酸低、高浓度组细胞培养液上清HMGB1含量和细胞HMGB1总蛋白及HMGB1 mRNA表达均显著降低(P<0.05或P<0.01);激光共聚焦显微镜结果表明,LPS组红色标记的HMGB1出现在细胞质内,大黄酸组胞质内的HMGB1显著减少,胞核增多。与LPS组比较,大黄酸低、高浓度组细胞HDAC3总蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:大黄酸能有效抑制LPS刺激下RAW264.7细胞HMGB1的表达和释放。

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