腺苷酸环化酶激活剂调控FMR1基因启动子活性及作用位点CRE的鉴定

作者：陈瑶; 秀芳; 张红琴; 姚英民

来源：中国优生与遗传杂志, 2014, 22(12): 12-20.

DOI：10.13404/j.cnki.cjbhh.2014.12.004

• 脆性X智力低下一号基因(FMR1)
• 双荧光素酶报告基因系统
• AC激动剂
• MSE/CRE

目的本研究试图证明,特异性腺苷酸环化酶激活剂forskolin(FSK)可以通过调控FMR1启动子区内的MSE/CRE位点而再激活封闭的FMR1基因。方法拟以FMR1启动子MSE/CRE位点为研究对象,在不改变MSE的整体结构功能的情况下,运用分子生物学方法诱导CRE位点突变,达到其灭活CRE功能目的,从而建立正常MSE以及两种CRE突变启动子M1、M2双荧光素酶报告基因系统,比较CRE在正常或灭活情况下,FSK药物对FMR1诱导效果的影响。结果成功构建FMR1启动子区MSE/CRE位点双荧光素酶报告基因系统,结果显示当CRE位点正常时,FSK对活性低下的FMR1启动子有显著地激活作用,而当CRE位点突变之后,FSK则无此作用,由此证实CRE位点是FSK重启FMR1基因的关键位点。结论提示腺苷酸环化酶激活剂FSK可能主要是通过FMR1启动子区内的MSE/CRE重叠位点,经c AMP通路实现了对FMR1基因的调控。

• 单位
  南方医科大学; 南方医科大学南方医院