摘要

目的探讨IGF-1过表达的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对缺氧时小鼠心肌细胞凋亡的影响。方法以小鼠BMSCs为研究对象,利用慢病毒转染技术,构建过表达IGF-1的BMSCs(IGF-1-BMSCs)及其对照细胞(NC-BMSCs)。与正常培养相比,1%氧浓度构建低氧诱导的细胞凋亡模型。流式细胞术观察低氧诱导对BMSCs及心肌细胞凋亡率的影响;流式细胞术观察加入IGF-1-BMSCs上清液时低氧诱导对心肌细胞凋亡率的影响; Western blotting检测低氧模型细胞内Bcl-2家族促凋亡蛋白(Bax)及抗凋亡蛋白(Bcl-2)、Caspase家族蛋白(caspase-3、8、9)及细胞色素C(Cyto C)的表达。结果与NC-BMSCs细胞对比,低氧诱导时IGF-1-BMSCs细胞的凋亡率明显下降[(36.85±1.02)%vs (15.66±4.36)%,P <0.05],抗凋亡蛋白Bcl-2明显增加,而促凋亡蛋白Bax、caspase-3、caspase-8及细胞色素C的释放明显减少(P <0.05)。与正常培养相比,低氧处理显著诱导心肌细胞凋亡[(10.89±1.62)%vs (42.30±2.53)%,P <0.05]。与NC-BMSCs细胞对比,IGF-1-BMSCs细胞上清液培养的心肌细胞凋亡率显著降低[(45.78±3.26)%vs (21.45±5.46)%,P <0.05],且抑制凋亡的效应呈时间及浓度依赖性。与NC-BMSCs细胞对比,IGF-1-BMSCs细胞上清液使低氧诱导的心肌细胞内凋亡蛋白Bcl-2明显增加,而促凋亡蛋白Bax、caspase-3、caspase-8及细胞色素C的释放明显减少(P <0.05)。结论过表达IGF-1可增强小鼠骨髓间充质干细胞自身抗凋亡能力,其细胞培养上清液可抑制低氧诱导时心肌细胞凋亡。

全文