KAT2A通过Survivin乙酰化抑制Wnt/β-catenin通路调控食管癌的机制

作者：梁宗英; 杨阳; 孙光蕊; 郑竞雄; 赵宝山; 侯继申^*

来源：临床与实验病理学杂志, 2022, 38(12): 1432-1438.

DOI：10.13315/j.cnki.cjcep.2022.12.005

• 食管肿瘤
• KAT2A
• Survivin
• 乙酰化修饰
• Wnt/β-catenin信号通路

目的 探讨食管癌组织中KAT2A与Survivin蛋白乙酰化相关性及下调KAT2A对食管癌细胞Survivin乙酰化、Wnt/β-catenin通路及功能的影响。方法 免疫共沉淀实验(Co-IP)检测蛋白乙酰化，免疫组化及Western blot法检测蛋白的表达。生物信息学预测乙酰基转移酶以Survivin为底物发生乙酰化的关系，免疫荧光验证蛋白在癌组织中的定位及表达；构建合成KAT2A小干扰RNA序列，脂质体介导法转染食管癌细胞，qRT-PCR检测mRNA的相对表达量，应用MTT、划痕愈合和Transwell小室实验检测细胞存活率、迁移和侵袭能力。结果 免疫组化结果显示，食管癌组织中Survivin蛋白阳性率为71.11%(32/45),高于正常食管黏膜组织的28.89%(13/45);癌组织和正常食管黏膜组织中KAT2A蛋白阳性率分别为75.56%(34/45)和24.44%(11/45),差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示，Survivin在癌组织中表达为(74.35±3.43)%,高于正常食管黏膜组织(22.62±2.48)%;KAT2A在癌组织中表达为(70.68±3.15)%,高于正常食管黏膜组织(23.87±2.67)%,差异有统计学意义(P<0.05)。食管癌组织中Survivin蛋白发生了乙酰化，其乙酰化率为(66.48±3.14)%,高于正常食管黏膜组织的(17.31±2.42)%,差异有统计学意义(P<0.05)。生物信息学预测显示：乙酰基转移酶KAT2A可以催化Survivin为底物发生乙酰化，且免疫荧光证实Survivin和KAT2A蛋白在癌组织中同时呈高表达，两者主要表达于细胞质中，部分表达于细胞核中；食管癌组织中Survivin乙酰化和KAT2A表达呈正相关(r=0.326,P=0.025);体外实验结果显示，KAT2A在食管癌EC109细胞中的阳性率为(87.36±4.24)%,高于正常食管上皮HEEC细胞的(17.45±2.78)%。食管癌EC109细胞内Survivin蛋白乙酰化水平为(87.79±4.12)%,显著高于正常食管上皮HEEC细胞中的(21.28±3.78)%。下调KAT2A后食管癌细胞内Survivin乙酰化水平显著下降，同时wnt3α、β-catenin和c-myc蛋白表达量下降，且抑制了细胞存活、迁移和侵袭能力。结论 食管癌病变过程中乙酰基转移酶KAT2A高表达与Survivin蛋白乙酰化修饰具有相关性；KAT2A下调可使Survivin发生去乙酰化，并通过阻断Wnt/β-catenin信号通路影响食管癌细胞的功能。

• 出版日期2022
• 单位承德医学院附属医院; 河北省胸科医院