A型肉毒毒素轻链蛋白的表达及纯化

作者：徐艳玲; 岳玉环; 张国利; 吴广谋; 田园; 张培培; 付玉和; 赵鑫; 侯天全

来源：中国生物制品学杂志, 2016, (05): 469-472.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.001318

• A型肉毒毒素轻链
• 大肠埃希菌
• 基因表达
• 纯化 Botulinus neurotoxins serotype A light chain
• E.coli
• Gene expression
• Purification

目的构建A型肉毒毒素轻链表达载体重组质粒,在大肠埃希菌中表达后,利用金属螯合层析柱纯化。方法以p GEM-Bo NT/AL轻链质粒为模板,PCR扩增Bo NT/AL基因,克隆至表达载体p ET-28(a)中,构建重组质粒p ET-28(a)-Bo NT/AL,转化E.coli BL21(DE3),分别于37、30、25℃IPTG诱导表达,表达产物经Chelating Sepharose 4Fast Flow(Cu~(2 ))层析柱纯化,纯化产物经尿素梯度复性。结果质粒p ET-28(a)-Bo NT/AL经酶切鉴定及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约52 000,主要以包涵体形式存...

• 出版日期2016
• 单位军事医学科学院军事兽医研究所; 吉林农业大学