As2O3联合γ分泌酶抑制剂MW167对人肝癌HepG2/ADM细胞耐药性的影响

作者：杨莉; 王雪雯; 周明; 张帆

来源：吉林大学学报(医学版), 2018, 44(01): 1-7.

DOI：10.13481/j.1671-587x.20180101

• 三氧化二砷
• 肝肿瘤
• Notch信号通路
• 多药耐药
• 细胞凋亡
• 细胞增殖

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)和γ分泌酶抑制剂MW167单独及联合作用对HepG2/ADM细胞耐药性的影响,并阐明其作用机制。方法:MTT法检测不同浓度As2O3(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00和8.00mg·L-1)和MW167(10、20和40μmol·L-1)处理HepG2/ADM细胞24、48和72h后细胞的吸光度(A)值,计算细胞增殖抑制率,确定药物作用浓度和时间;将HepG2/ADM细胞分为空白组、As2O3组、MW167组、As2O3和MW167联合组;根据MTT结果选取无细胞毒剂量的As2O3、MW167干预各组细胞48h后,FCM法检测细胞凋亡率;RT-PCR和Western blotting法分别检测各组细胞中Notch-1、Hes-1、MDR-1(P-gp)、Bcl-2和Bax mRNA及蛋白表达水平。结果:在同一浓度时,As2O3和MW167对HepG2/ADM细胞的增殖抑制率随着作用时间的延长而升高(P<0.05或P<0.01);在同一时间点,As2O3和MW167对HepG2/ADM细胞的增殖抑制率随药物浓度的增加而升高(P<0.05);确定As2O3和MW167的无毒剂量分别为0.25mg·L-1和10μmol·L-1,干预时间为48h。药物干预48h后,与空白组比较,各干预组细胞凋亡率均升高(P<0.05),其中以联合组升高最为明显(P<0.01)。与空白组比较,各干预组细胞中Notch-1、Hes-1、MDR-1(P-gp)和Bcl-2mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),其中以联合组降低最为明显(P<0.01);与空白组比较,各干预组Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),其中以联合组升高最为明显(P<0.01)。结论:As2O3可逆转HepG2/ADM细胞的耐药性,其作用机制可能与抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、下调细胞中Notch-1、Hes-1、MDR-1(P-gp)和Bcl-2基因及蛋白表达水平及上调Bax基因和蛋白表达水平有关。

• 出版日期2018
• 单位石河子大学; 新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室