山羊痘病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作者：姚俊; 段**; 陈官国; 彭海生; 鲁富有; 杨永军; 李华春

来源：山地农业生物学报, 2012, (05): 412-419.

DOI：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2012.05.023

• 山羊痘病毒
• TaqMan
• 实时荧光定量PCR Goat pox virus
• TaqMan
• real-time fluorescence quantitative PCR

根据GenBank中山羊痘病毒(AY077835)gp063基因DNA序列,应用Beacon Designer 7.0软件,设计合成1对引物和1条TaqMan探针,同时制备含有靶DNA序列的pEASY-T1重组质粒标准品。通过引物、探针浓度的筛选及反应条件的优化,建立了山羊痘病毒TaqMan法实时荧光定量PCR。该方法组内和组间重复试验变异系数均低于2%,最低浓度检测极限值为1×100copies/μL,上机检测时间少于40 min。运用该方法对不同时期流行于云南局部的山羊痘临床组织病料进行定量检测,生成的标准曲线斜率(Slope)为-3.36,截距(Intercept)为41.08,相关系数...

• 出版日期2012
• 单位云南省畜牧兽医科学院