黑色素皮质素受体激动剂的高通量筛选模型研究

作者：郑旭煦; 欧阳克清; 高虹; 许治良; 胡应和; 蔡绍皙

来源：生物化学与生物物理进展, 2004, (01): 36-40.

• 黑色素皮质素受体(MC4R)
• 报告基因
• 激动剂
• 高通量筛选

为了建立黑色素皮质素受体 (MC4R)激动剂的高通量筛选方法 ,将人的MC4R基因质粒 (hMC4R/pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染到HEK2 93细胞 ,通过G4 1 8筛选 ,建立了稳定的MC4R激动剂筛选细胞株 .利用MC4R内源激动剂α MSH探索和优化了每孔接种细胞数目、激动剂孵育时间、溶剂DMSO终浓度、荧光素酶底物浓度等筛选条件 ,建立了可靠的筛选方法 .实验表明 :当细胞数目为 4× 1 0 4个 /孔 ,激动剂孵育时间为 8h ,每孔DMSO终浓度小于 1 %和α MSH终浓度为 1 μmol/L时 ,系统Z 因子接近 0 7,能够用于MC4R激动剂的高通量筛选

• 出版日期2004-1-20
• 单位重庆工商大学