抗HIF-1α肺腺癌人源单链抗体的筛选和初步鉴定

作者：王洁; ***; 庞华; 彭志平; 李少林

来源：第三军医大学学报, 2009, (23): 2319-2322.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2009.23.033

• 噬菌体抗体库
• 单链抗体
• HIF-1α
• 肺腺癌

目的从单链大容量噬菌体抗体库中筛选特异性的抗HIF-1α肺腺癌人源单链抗体(scFv),并进行初步鉴定。方法先后以肺腺癌细胞A549、HIF-1α为抗原,通过"吸附-洗脱-扩增"从大容量噬菌体抗体库中筛选特异性抗体,感染大肠杆菌HB2151,实现可溶性抗体的表达,ELISA、免疫细胞化学检测抗原-抗体结合活性,SDS-PAGE和Western blot检测可溶性抗体表达和相对分子质量。结果经筛选后,单链抗体得到富集。随机选取10个克隆,ELISA检测5个与HIF-1α抗原呈阳性反应,阳性率为50%。免疫细胞化学表明抗体与A549细胞特异性结合。SDS-PAGE、Western blot证明单链抗体成功可溶表达,且相对分子质量在30×103左右,ELISA显示其有较好的特异性。结论利用单链大容量噬菌体抗体库技术成功获得特异性抗HIF-1α的肺腺癌人源单链抗体。

• 出版日期2009
• 单位重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院