摘要

目的探讨炎症作用下NF-κB通路对人牙龈间充质干细胞(GMSCs)分泌炎性因子能力的影响。方法体外分离纯化培养正常组织来源的GMSCs。在相同培养条件下,GMSCs被分成3组。应用梯度浓度TNF-α(0、10、20 ng/ml)诱导12 h。Annexin V-FITC/PI双染检测3组间GMSCs凋亡率差异。应用Western blot检测NLK、I-κBα、P-IκBα在NF-κB激活通路中的表达,Real-Time PCR检测TNF-α、IL-1β在GMSCs加入抑制剂BAY 11-7082后基因表达变化。结果凋亡检测显示,GMSCs凋亡率与TNF-α浓度呈正相关(P<0.05);Western blot结果显示,与对照组相比,NLK、I-κBα表达随TNF-α浓度增加而降低(P<0.05),而P-IκBα表达量呈显著增高趋势(P<0.01)。PCR检测结果显示,随外源性TNF-α浓度升高,10 ng/ml组与20 ng/ml组GMSCs的TNF-α与IL-1β基因表达量也显著升高(P<0.01)。TNF-α诱导组加入NF-κB抑制剂BAY 11-7082后检测GMSCs,10 ng/ml组与20 ng/ml组IL-1β与TNF-α基因表达量下降,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GMSCs中NLK在炎性环境下表达量降低,炎性因子可以通过NF-κB通路增强牙龈间充质干细胞中TNF-α和IL-1β的表达。