摘要

目的生长抑制蛋白家族成员(ING)5对皮肤鳞状细胞癌(CSCC)干细胞(CSCs)顺铂化疗敏感性的影响及作用机制。方法收集CSCC患者新鲜肿瘤组织,分离培养原代CSCC细胞。Western印迹检测CSCs中干性蛋白Sox2、Nanog、Oct4的表达水平。siRNA转染CSCs分为si-NC组和si-ING5组,3-(4,5-二甲基吡啶-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(MTS)检测ING5 siRNA转染CSCs后对顺铂敏感性的影响;qRT-PCR法检测顺铂处理CSCs后细胞中ING5 mRNA的表达变化。软琼脂克隆实验检测ING5对顺铂处理的CSCs肿瘤球形成能力的影响;流式细胞仪检测ING5对顺铂处理的CSCs凋亡的影响。Western印迹检测ING5对顺铂处理的CSCs凋亡蛋白B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响。结果流式细胞仪分选出CD133+的细胞占全部细胞的1.98%,CD133+细胞中Sox2、Nanog、Oct4蛋白的表达水平显著升高;MTS结果显示干扰ING5的表达显著增加CSCs对顺铂的敏感性;qRT-PCR结果显示顺铂处理的CSCs中ING5 mRNA的表达显著增加;软琼脂克隆实验结果显示干扰ING5的表达显著抑制顺铂处理的CSCs肿瘤球形成能力;流式细胞仪结果显示干扰ING5的表达显著增加顺铂处理的CSCs凋亡;Western印迹检测发现干扰ING5的表达显著降低顺铂处理的CSCs凋亡蛋白Bcl-2的表达,增加顺铂处理的CSCs凋亡蛋白Bax的表达。结论降低ING5的表达可能通过激活凋亡信号通路,增加CSCC干细胞顺铂化疗敏感性。

  • 出版日期2021
  • 单位遵义市第一人民医院