抗CD3/抗CD19微型双功能抗体的构建、表达及活性测定

作者：李崴; 范冬梅; 程昕; 师锐赞; 刘荣; 任思楣; 王敏; 杨铭

来源：中国癌症杂志, 2010, (04): 241-246.

• 基因工程抗体
• 双功能抗体
• CD3
• CD19
• 淋巴瘤
• 免疫治疗 gene engineering antibody
• bispecific antibody
• lymphoma
• immunotherapy

背景与目的:微型双功能抗体是基因工程抗体的一种形式,它具有两个抗原结合位点,可选择性募集效应细胞到靶细胞周围,介导特异性杀伤作用。本实验构建抗CD3/抗CD19微型双功能抗体(diabody)载体,表达纯化后测定其生物学活性。方法:用重叠PCR(overlap PCR)和PCR方法,构建抗CD3/抗CD19 diabody载体,转化感受态大肠埃希菌进行原核表达。表达产物经抗His-tag亲和层析柱分离纯化,12% SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定。应用间接免疫荧光和竞争性免疫荧光结合流式细胞分析技术(FACS)检测生物学活性。结果:基因重组质粒经测序证实序列正确。抗CD3/抗...

• 出版日期2010
• 单位天津医科大学; 中国医学科学院; 北京协和医学院; 实验血液学国家重点实验室