摘要

目的观察过表达miR-21对脂多糖(LPS)诱导的人牙髓干细胞(hDPSCs)炎症、凋亡和自噬的影响。方法取生长良好的第3~4代hDPSCs,随机分为对照组、LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组,LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组分别使用Lipofectamine 2000转染试剂转染miR-NC mimics、miR-21mimics,LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组均加入5μg/mL LPS,继续培养48 h。采用ELISA法检测各组细胞上清液白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测凋亡相关蛋白裂解的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)和自噬相关蛋白死骨片1(p62)、自噬微管相关蛋白轻链3抗体(LC3B)表达。结果与对照组比较,LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组细胞上清液IL-1β、IL-6、TNF-α水平均升高,且LPS组、LPS+miR-NC mimics组升高更明显(P均<0.05)。与对照组比较,LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组细胞凋亡率及细胞Cleaved Caspase-3、LC3BⅡ表达均升高,p62、LC3BⅠ表达均降低,且LPS组、LPS+miR-NC mimics组变化更明显(P均<0.05)。结论 LPS可诱导hDPSCs发生炎症反应,并促进其凋亡和自噬,而过表达miR-21可以抑制LPS的上述作用。

  • 出版日期2021
  • 单位厦门医学院; 青岛市中心医院