LNA-taqman探针实时荧光PCR快速检测CYP4F2-C1347T,CYP2C9*3,VKORC1-C1173T与VKORC1-G1639A基因多态性方法的建立

作者：尹栩芳; 蒋卫霞; 饶品彬

来源：现代检验医学杂志, 2017, 32(06): 1-10.

• 华法林
• CYP4F2
• CYP2C9
• VKORC1

目的建立一种基于LNA-taqman探针实时荧光PCR检测华法林剂量相关基因型维生素K单氧酶CYP4F2,维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)和细胞色素P4502C9(CYP2C9)的方法。方法针对CYP4F2-1347C>T,CYP2C9*3,VKORC1-1173C>T与VKORC1-1639G>A四个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别设计一套等位基因特异性探针与引物,并对LNA-taqman探针特异性进行评价。提取150例接受华法林治疗患者外周血样本基因组DNA进行检测,同时对部分实时荧光PCR产物样品进行验证。结果 (1)LNA-taqman探针检测方法特异性高,没有交叉性。(2)150例患者中,CYP4F2-1347C>T基因型CC,CT和TT分别有87,56和7例,各占58%,37.3%和4.7%;CYP2C9*3基因型*11和*13分别有142和8例,各占94.7%和5.3%,未检出纯合子*33基因型;VKORC1-1173C>T基因型TT,TC和CC分别有127,20和3例,各占84.7%,13.3%和2%;VKORC1-1639G>A基因型AA,AG和GG分别有124,23和3例,各占82.7%,15.3%和2%。结论基于LNA-taqman探针的实时荧光PCR分型方法具有操作简便,价格低廉,结果准确可靠等特点,适于临床实验室对CYP4F2,CYP2C9*3,VKORC1的基因分型。

• 出版日期2017
• 单位上海交通大学; 苏州九龙医院