耐甲氧西林金黄色葡萄球菌CHIPS基因的克隆、序列分析及原核表达

作者：容莉莉; 杨镒宇; 关锐梨; 关小珊; 邓秋连; 谢永强; 周珍文

来源：广州医药, 2013, (04): 1-4.

• MRSA
• CHIPS
• 克隆
• 原核表达 MRSA
• CHIPS
• Cloning
• Prokaryotic expression

目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)趋化抑制蛋白(CHIPS)进行扩增、克隆、序列分析、原核表达及纯化,为后续的疫苗研究奠定基础。方法根据GenBank中趋化抑制蛋白(CHIPS)的序列,设计一对特异性引物,以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA为模板PCR扩增CHIPS基因,纯化DNA进行EcoRI、XhoI双酶切鉴定及测序鉴定,并将CHIPS亚克隆入表达载体PET-28α,转化感受态大肠杆菌BL21,对质粒进行双酶切鉴定及基因序列分析,用IPTG诱导表达重组蛋白,His标签单克隆抗体进行免疫印迹验证重组蛋白的表达。结果以金黄色葡萄球菌临床儿童分离株基因组为模板,成功扩增CHIPS基因,基因...

• 出版日期2013
• 单位广州医科大学; 广州市妇女儿童医疗中心