低血清培养PK-15细胞及其增殖猪圆环病毒2型的研究

作者：张瑞永; 管宇; 吴信明; 梅建国; 姚春阳; 沈志强; 雷连成

来源：动物医学进展, 2016, 37(09): 16-20.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2016.09.004

• PK-15细胞
• 低血清培养基
• 猪圆环病毒2型
• 增殖
• 间接免疫荧光

依次采用含60、30、20、10mL/L血清浓度的低血清培养基驯化PK-15细胞,并给驯化好的细胞上接种猪圆环病毒2型(PCV-2),以确定PCV-2在该培养体系下的生长情况。结果用含60、30、20mL/L血清浓度的低血清培养基各进行3代次驯化,PK-15细胞能完全适应且生长状态良好;当血清浓度降至10mL/L时,传代1次细胞无法保持良好状态,细胞出现贴壁较差、生长停滞等现象。各血清浓度培养体系中细胞生长曲线测定结果显示,在细胞培养的0、24、48、72、96h各组细胞密度与常规培养的对照组差别不明显。因此用该低血清培养体系培养PK-15细胞时,血清最低添加量为20mL/L。用该体系培养的PK-15细胞接种PCV-2后,通过荧光抗体染色测定病毒滴度。结果显示,低血清培养的PCV-2病毒滴度为106.5TCID50/mL,与常规条件培养的PCV-2对照(病毒滴度为106.375 TCID50/mL)差别不明显,表明该体系可用于PCV-2的增殖。表明研究建立了PK-15细胞低血清培养PCV-2体系,为PCV-2的相关研究奠定了基础。

• 出版日期2016
• 单位吉林大学