K562白血病细胞中Musashi2干扰慢病毒载体的构建和鉴定

作者：张慧娟; 胡蓉; 江丽霞

来源：赣南医学院学报, 2019, 39(05): 451-454.

• musashi2
• 白血病
• 慢病毒载体

目的:构建干扰Musashi 2 (Msi2)的慢病毒载体,并探究其在K562白血病细胞株中的干扰效率。方法:将两个Msi2干扰片段分别连接入GV418慢病毒载体,与pHelper1. 0、pHelper2. 0辅助载体共转染入293T细胞进行慢病毒包装。提取细胞上清感染白血病K562细胞,并用嘌呤霉素药物稳筛,获取稳定感染细胞株。定量PCR和western blot分别检测K562细胞内Msi2的干扰效率。结果:与对照组比较,干扰组shMsi2-1和shMsi2-2的Msi2 mRNA水平分别降为3%和28%(P <0. 05);与对照组相比,优选出的shMsi2-1组中Msi2蛋白水平也显著下降(P <0. 05)。结论:成功构建Msi2干扰慢病毒载体并显著沉默白血病K562细胞中Msi2的表达,为后续研究Msi2在白血病中的功能和机制奠定实验基础。

• 出版日期2019
• 单位赣南医学院第一附属医院