茶多酚联合表柔比星对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响及机制

作者：杨帆; 何卫阳; 朱鑫; 刘关羽; 苟欣

来源：重庆医科大学学报, 2015, 40(08): 1078-1083.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.000478

• 膀胱癌
• 自噬
• 茶多酚
• 表柔比星

目的:研究茶多酚(polyphenols,TP)对表柔比星(epirubicin,EPI)诱导人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响,探讨两者联合对T24细胞生长影响的机制。方法:不同浓度TP和EPI作用膀胱癌T24细胞24 h,MTT试验选择药物作用浓度TP(88.8μmol/L)和EPI(4.6μmol/L)。试验分空白对照组、TP组(88.8μmol/L)、EPI组(4.6μmol/L)、联合组(TP 88.8μmol/L+EPI 4.6μmol/L)共4组,处理T24细胞24 h后,Annexin V-PI双流式细胞术检测各组细胞凋亡率;处理T24细胞8 h后,透射电镜观察各组细胞内自噬体的变化;处理稳定表达GFP-LC3的T24细胞8 h后,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白LC3荧光斑的形成与变化;处理T24细胞不同时间,Western blot技术检测自噬标志蛋白LC3-Ⅱ(8 h)、底物蛋白P62(8 h)、凋亡相关蛋白CASP3、PARP(16 h)表达变化。结果:TP(88.8μmol/L)联合EPI(4.6μmol/L)处理组较单药组引起的细胞增殖抑制率(F=730.411,P=0.000)和细胞凋亡率(F=161.945,P=0.000)明显提高。EPI(4.6μmol/L)单药处理T24细胞后引起明显自噬,透射电镜下细胞质内自噬体双层膜结构形成;荧光显微镜下胞质内有明显点状荧光斑聚集形成,且含荧光斑的细胞数量也明显增加,差异有统计学意义(F=41.944,P=0.000);Western blot结果显示EPI组自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达增多,P62表达降低。联合TP作用后自噬明显减弱,自噬相关蛋白表达降低,而凋亡相关蛋白活性显著增高。结论:TP可以增强EPI对膀胱癌T24细胞的致凋亡敏感性,其机制与TP抑制EPI化疗过程中诱导的保护性自噬有关。

• 出版日期2015
• 单位重庆医科大学附属第一医院