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摘要
目的:研究Sox9基因过表达对人脂肪干细胞(hADSCs)增殖、凋亡及成软骨分化的影响及机制。方法:酶消化法分离hADSCs体外培养扩增,Lenti-Sox9-EGFP、Lenti-EGFP慢病毒液分别感染hADSCs,设为过表达组和空载组,另以无菌生理盐水代替设为对照组。比较各组Sox9蛋白表达、细胞增殖、转化生长因子β1(TGF-β1)、信号转导蛋白3(Smad 3)蛋白表达、细胞凋亡情况;hADSCs成软骨诱导分化2周检测成软骨分化情况;比较各组TGF-β1、Smad 3蛋白表达情况。结果:显微镜下观察hADSCs细胞形态正常,流式细胞计数鉴定hADSCs表面抗原符合生物学特征。与空载组和对照组比较,过表达组Sox9蛋白相对表达量更高,MTT试验24 h、48 h、72 h的A值与培养24 h、48 h、72 h后TGF-β1、Smad 3蛋白相对表达量较高,凋亡率降低(P<0.001)。成软骨诱导分化2周后甲苯胺蓝染色显示过表达组hADSCs胞浆及细胞核为蓝紫色,空载组和对照组为微弱淡蓝色;Ⅱ型胶原免疫组化染色过表达组为强阳性,空载组和对照组为弱阳性。与对照组和空载组比较,过表达组TGF-β1、Smad 3蛋白相对表达量更高(P<0.001)。结论:Sox9基因过表达可促进hADSCs增殖及成软骨分化,抑制hADSCs凋亡,其机制可能与上调TGF-β1、Smad 3蛋白的表达有关。
- 出版日期2021
- 单位青海省人民医院
