禽呼肠孤病毒蛋白p17互作蛋白的筛选与鉴定

作者:赵富熙; 张成成; 王延龙; 鄢坤; 郭梦娇; 张小荣; 吴艳涛*
来源:中国动物传染病学报, 2023, 31(02): 28-35.
DOI:10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20211118.002

摘要

禽呼肠孤病毒(ARV)p17蛋白在诱导细胞自噬和促进病毒复制中发挥重要作用,但与宿主细胞之间的相互关系及其致病机制尚不清楚。本研究将ARV GX/2010/1株病毒液以104.3 TCID50/0.2 mL通过滴鼻点眼注射感染7日龄SPF鸡。应用SmartTM技术构建该鸡肝组织c DNA文库,且文库滴度达到2.6×107 CFU/mL。以p17为诱饵蛋白,利用酵母双杂交系统筛选得到16个互作候选克隆,经酵母回复验证得到9个阳性克隆并送至测序。通过NCBI和Uniport等在线数据库比对分析得到PRPS2、IFI16、GTPBP4、IGF2BP1等胞内互作蛋白。基因功能分析显示,这些蛋白参与宿主细胞先天免疫反应、RNA的运输与翻译、结合核糖蛋白复合物、细胞粘附与迁移等生物学过程。对这些互作蛋白的深入研究将为进一步了解ARV及其p17蛋白致病的分子机制奠定基础。

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