摘要

目的建立快速检测食品中大肠杆菌O157︰H7的双重荧光PCR方法。方法针对大肠杆菌O157︰H7菌体抗原O和鞭毛抗原H的特异性基因rfbE(O157)和fliC(H7)筛选设计引物和探针,优化反应条件,建立可特异性检测大肠杆菌O157︰H7的双重荧光PCR方法,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行评价,对模拟样品和实际样品进行初步验证。结果利用建立的方法对2株大肠杆菌O157︰H7及12株非大肠杆菌O157︰H7进行检测,O157︰H7菌株检测结果均为rfbE和fliC阳性,非O157︰H7菌株检测结果均为阴性,rfbE和fliC基因的特异性均为100%;2基因的检测灵敏度可达1.16×10~...