β-葡萄糖苷酶bglⅠ基因在粟酒裂殖酵母中的表达及功能分析

作者：付永平; 李博; 王丕武; 高玮; 夏海丰; 张卓

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2012, (12): 171-176.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2012.12.009

• 绿色木霉
• β-葡萄糖苷酶
• 粟酒裂殖酵母
• 酶学活性 Trichoderma viride
• bglⅠ gene
• Schizosaccharomyces pombe
• cellubiohydrolase activity

【目的】克隆绿色木霉β-葡萄糖苷酶bglⅠ基因,并在粟酒裂殖酵母细胞中进行表达分析。【方法】利用PCR技术,从绿色木霉中克隆纤维素酶β-葡萄糖苷酶bglⅠ基因的DNA序列,再通过XhoⅠ和NotⅠ2个酶切位点与粟酒裂殖酵母表达载体pREP5N连接,构建酵母真核表达载体,利用电转化方法转化粟酒裂殖酵母SP-Q01细胞,并在SP-Q01中进行表达分析,最后采用DNS法测定表达产物的酶学活性。【结果】PCR扩增得到2 380bp的bglⅠ基因序列,包括完整的CDS序列和信号肽序列,编码序列与已报道的里氏木霉纤维素酶基因序列相似性为100%;对酵母转化子进行诱导培养后,SDS-PAGE电泳检测得到大小...

• 出版日期2012
• 单位吉林农业大学