敲减KRT19基因表达对膀胱癌T24细胞恶性生物学行为的影响

作者:孔朝辉; 王蓬勃; 张灏; 韩皓名; 张汉青
来源:中华实用诊断与治疗杂志, 2022, 36(08): 761-764.
DOI:10.13507/j.issn.1674-3474.2022.08.002

摘要

目的 探讨敲减KRT19基因表达对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡、集落形成的影响。方法 对数生长期T24细胞分为shKRT19组和对照组,分别转染shKRT19慢病毒质粒和空载慢病毒质粒,转染48 h,采用实时荧光定量PCR法检测2组细胞KRT19 mRNA相对表达量,采用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡率;转染后培养0、24、48、72、96 h时采用CCK-8法检测2组细胞增殖率;转染72 h采用克隆形成实验观察2组培养11 d细胞克隆形成数目。结果 转染48 h, shKRT19组细胞KRT19 mRNA相对表达量(0.02±0.00)低于对照组(1.00±0.01)(t=169.741,P<0.001),细胞凋亡率[(18.97±2.12)%]高于对照组[(4.89±0.17)%](t=—10.847,P<0.001),G0/G1期[(57.72±3.59)%]、S期[(9.69±0.49)%]、G2/M期[(32.59±3.65)%]细胞比率与对照组[(52.84±1.76)%、(11.01±0.85)%、(36.15±2.29)%]比较差异均无统计学意义(P>0.05)。shKRT19组转染后培养24、48、72、96 h时细胞增殖率[(181.5±2.1)%、(248.9±4.5)%、(337.9±23.4)%、(421.7±3.2)%]均低于对照组[(206.3±4.9)%、(375.4±6.3)%、(546.3±27.9)%、(778.8±4.4)%](P<0.05)。培养11 d, shKRT19组细胞克隆形成数目[(115±3)个]少于对照组[(147±11)个](t=4.861,P<0.001)。结论 敲减KRT19基因表达可抑制膀胱癌T24细胞生长、增殖和集落形成,促进细胞凋亡。

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