青石止痒软膏对TNF-α/IFN-γ诱导角质形成细胞炎症模型的影响及机制

作者：赵欣楠; 蔡玲玲; 任雪雯; 邓宇童; 姜晓媛; 李雪; 胡博; 杭小涵; 于心荟; 李元文^*

来源：北京中医药, 2022, 41(11): 1239-1244.

DOI：10.16025/j.1674-1307.2022.11.008

• 炎症性皮肤病
• 青石止痒软膏
• 角质形成细胞
• 肿瘤坏死因子α
• γ干扰素
• 信号素3A
• 神经生长因子

目的 探讨青石止痒软膏对肿瘤坏死因子α (TNF-α)/γ干扰素（IFN-γ）诱导的人永生化角质形成细胞（HaCaT）和人表皮角质形成细胞炎症模型的影响及机制。方法 将HaCaT细胞和人表皮角质形成细胞分别分为空白组、模型组及实验组。空白组不予任何干预措施；模型组用TNF-α (10 ng/mL)+IFN-γ (10 ng/mL)刺激6 h诱导炎症模型；实验组在造模的基础上分别用0.000 1、0.001、0.01、0.1 g/mL的青石止痒软膏含药培养基培养，并根据以上浓度分为4个亚组。以细胞计数试剂盒-8法测定青石止痒软膏对细胞活力的影响，以实时反转录聚合酶链反应法定量microRNA-145(miRNA-145)，免疫印迹法检测信号素3A (Sema3A)蛋白表达，酶联免疫吸附测定法测定细胞培养上清中白细胞介素31(IL-31)、神经生长因子（NGF）、神经营养因子4 (NT-4)水平。结果 不同浓度青石止痒软膏对细胞增殖无明显抑制。HaCaT细胞：与空白组比较，模型组miRNA-145表达低，Sema3A蛋白表达高，细胞培养上清中IL-31、NGF、NT-4水平高（P<0.05）。与模型组比较，0.001 g/mL组、0.01 g/mL组、0.1 g/mL组miRNA-145表达均升高（P<0.05）;Sema3A蛋白表达均降低（P<0.05）;0.000 1 g/mL组、0.001 g/mL组、0.01 g/mL组、0.1 g/mL组细胞培养上清中IL-31、NGF、NT-4水平均逐渐降低，且后3组差异有统计学意义（P<0.05）。人表皮角质形成细胞：与空白组比较，模型组miRNA-145表达低，Sema3A蛋白表达高，细胞培养上清中IL-31、NGF、NT-4水平高（P<0.05）；与模型组比较，0.01 g/mL组、0.1 g/mL组miRNA-145表达高（P<0.05）;0.001 g/mL组、0.01g/mL和0.1 g/mL组Sema3A蛋白表达低（P<0.05）;0.01 g/mL组、0.1 g/mL组细胞培养上清中IL-31、NGF、NT-4水平低（P<0.05）,0.000 1g/mL组、0.001 g/mL组细胞培养上清中IL-31、NGF水平低（P<0.05）。结论 青石止痒软膏可以明显改善HaCaT细胞和人表皮角质形成细胞炎症，其机制可能是通过调控Sema3A/NGF及相关分子水平。

• 出版日期2022
• 单位北京中医药大学东方医院; 北京中医药大学