登革Ⅱ型病毒前膜蛋白基因反向重复序列具有干扰病毒复制的作用

作者：朱娉婷; 潘京; 郑学礼

来源：南方医科大学学报, 2013, (05): 642-648.

• 登革Ⅱ型病毒
• 前膜蛋白
• 反向重复序列
• RNA干扰
• BHK-21细胞 dengue virus type-2
• precursor M
• inverted-repeat RNA
• RNA interference
• BHK-21 cells

目的构建含有登革Ⅱ型病毒(DENV-2)前膜蛋白(prM)基因反向重复序列(irRNA)的重组质粒,评价其抑制病毒复制的效果。方法 DENV-2接种乳鼠,提取总RNA,在正义和反义引物两端分别加上XhoⅠ和EcoRⅠ的识别位点,将经RT-PCR扩增的prM全长基因片段插入pcDNA3.1( )中,形成含有prM反向序列的重组质粒pcDNA-asprM;于另一对正义和反义引物两端引入酶切位点NheⅠ和BglⅡ,经RT-PCR扩增prM全长基因片段插入pMD18-T-vector中,形成含有正向序列的重组质粒pMD18-T-prM。限制性内切酶NheⅠ和KpnⅠ分别酶切重组质粒pMD18-T-pr...

• 出版日期2013
• 单位南方医科大学