敲低BRIX1对三阴型乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

作者：简文静; 冯清枝; 盛海艳; 刘国文^*

来源：中国现代手术学杂志, 2022, 26(02): 81-87.

DOI：10.16260/j.cnki.1009-2188.2022.02.001

• BRIX1
• 乳腺肿瘤
• 三阴型乳腺癌
• 增殖
• 凋亡

目的 通过体外细胞实验观察BRIX1基因对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)细胞MDA-MB-231的增殖与凋亡的影响。方法 将MDA-MB-231细胞株分为实验组(shBRIX1组)及对照组(shCtrl组)。shBRIX1组采用构建敲低BRIX1基因表达的慢病毒载体转染MDA-MB-231细胞，以敲低BRIX1表达；shCtrl组采用慢病毒空载体转染MDA-MB-231细胞。应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)及Western Blot方法检测两组的转染效率；采用Celigo细胞成像技术、噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)实验连续5 d检测两组细胞的增殖情况；采用细胞克隆实验检测细胞克隆形成数；采用流式细胞仪荧光分选(fluorescence activated cell sorting, FACS)技术和Caspase3/7活性检测比较两组细胞的凋亡能力。结果 与shCtrl组细胞相比，敲低BRIX1表达的慢病毒载体转染MDA-MB-231细胞72 h后，RT-qPCR检测shBRIX1组中细胞的BRIX1基因表达水平明显下降(P<0.05);Western Blot检测shBRIX1组细胞中的BRIX1蛋白表达水平下降。敲低BRIX1后，Celigo、MTT及细胞克隆实验结果显示从第二天开始MDA-MB-231细胞增殖能力较shCtrl组明显下降(P<0.01);FACS实验及Caspase3/7活性检测结果显示敲低BRIX1组的MDA-MB-231凋亡细胞数量增加(P<0.05)。结论 下调BRIX1能抑制三阴型乳腺癌细胞增殖，促进凋亡，为寻找TNBC治疗新靶点提供实验依据。

• 出版日期2022
• 单位深圳市第二人民医院