提高重组表达体系相对活性促进外源蛋白表达:人干扰素毕赤酵母表达体系研究

作者：窦文芳; 张旦旦; 许泓瑜; 金坚; 许正宏; 史劲松; 陆震鸣

来源：食品与发酵工业, 2011, (11): 11-15.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2011.11.001

• 毕赤酵母
• 细胞相对活性
• 外源蛋白表达
• 人β干扰素 Pichia pastoris
• cell viability
• foreign protein expression
• human IFNβ-HSA fusion protein

以毕赤酵母KM71/IH的hIFNβ-HAS表达体系为研究对象,较为系统地研究了不同因素引起的细胞相对活性变化与毕赤酵母外源蛋白表达的相关性。结果表明:(1)细胞相对活性变化与外源蛋白的表达成正相关;(2)处在对数生长中后期的细胞相对活性最高,更适合用于外源蛋白的表达;(3)诱导阶段的环境因素直接影响诱导期细胞相对活性,合适的甲醇浓度、诱导pH及温度是维持细胞高活性,促进外源蛋白高表达的关键。对于hIFNβ-HAS表达体系最佳诱导条件为:以培养21～24h的细胞为诱导种子,初始甲醇浓度为2%(V/V),pH6.0,25℃,细胞活性维持在98%以上,hIFNβ-HSA表达量高达45.6mg/L,...

• 出版日期2011
• 单位江南大学