纤溶酶原饼环区5蛋白重组大肠杆菌高效表达体系的建立

作者:陈显久; 王惠珍; 于保锋; 程牛亮; 解军; 胥显民; 张悦红; 郝一彬; 牛勃
来源:中国生物制品学杂志, 2004, (04): 207-210.
DOI:10.13200/j.cjb.2004.04.15.chenxj.005

摘要

目的 建立纤溶酶原饼环区 5 (Humanplasminogenkringle 5 ,hPK 5 )蛋白重组大肠杆菌高效表达体系 ,为高密度发酵创造条件。方法 观察一级、二级种子的生长状态 ,比较表达hPK 5蛋白的 4种重组工程菌株在相同条件下的表达情况 ,选出首选发酵种子 ;对其培养时间、诱导时间、培养基种类、pH等条件进行优化 ;并用凝胶成像分析系统对SDS PAGE结果进行分析。结果 经过筛选 ,JM10 9 pBV2 2 0 hPK 5 (简称JP5 )是获取hPK 5蛋白的首选工程菌株 ,其最佳表达条件是LB培养基 (pH 7.4、溶解氧充足 )、30℃培养 3h、4 2℃诱导 6h。在此条件下 ,JP5表达目的蛋白占菌体总蛋白的 38%左右。结论 为高密度发酵获取hPK 5蛋白奠定了实验基础

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