拟南芥IAA7的原核表达及稳定性分析

作者：刘会珍; 罗为桂; 谢伟民; 胡月清; 苏益; 萧浪涛; 蔺万煌

来源：湖南农业大学学报(自然科学版), 2015, (02): 143-148.

DOI：10.13331/j.cnki.jhau.2015.02.006

• IAA7蛋白
• 原核表达
• GST标签
• 蛋白质纯化 IAA7 protein
• prokaryotic expression
• GST tag
• protein purification

以p GEX–KG为基本骨架,构建了拟南芥IAA7蛋白的原核表达载体,用IPTG诱导IAA7在3种大肠杆菌表达菌株Rosetta、BL21和Tuner中表达,利用GST SefiroseTM resin亲和树脂分离纯化GST–IAA7融合蛋白,并分析重组蛋白在体外保存时的稳定性。结果表明:GST–IAA7融合蛋白在Rosetta菌株中于25℃和0.4 mmol/L IPTG诱导下表达较好;蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(PMSF)可显著延长GST–IAA7在体外保存的时间,最后利用凝血酶切除GST标签后获得了纯化的IAA7蛋白质。

• 出版日期2015
• 单位湖南农业大学