抗EGFRvⅢ噬菌体抗体库的构建和筛选

作者：周敏; 石必枝; 顾健人; 李宗海

来源：中国生物工程杂志, 2010, (04): 1-7.

DOI：10.13523/j.cb.20100401

• 表皮生长因子受体突变体Ⅲ
• 噬菌体抗体库
• 单链抗体 Epidermal growth factor receptor variant type Ⅲ Phage antibody library Single chain antibody

目的:应用噬菌体展示技术筛选针对表皮生长因子受体突变体Ш(epidermal growth factorreceptor variant typeⅢ,EGFRvIII)的单链抗体(single chain Fv,scFv)。方法:利用原核表达纯化的人EGFRvIIIex蛋白和高表达EGFRvIIIex的小鼠成纤维细胞系NIH3T3免疫小鼠,扩增VH和VL片段并拼装成scFv基因,连接至噬菌粒pCANTAB5E,电击转化Hpd3cells,构建噬菌体单链抗体库,并进行3轮富集筛选。在第4轮筛选时,采用了降低抗原浓度的方法。然后将筛选得到的阳性克隆测序分析,转化E.coliHB2151,IPTG诱...

• 出版日期2010
• 单位癌基因与相关基因国家重点实验室; 上海市肿瘤研究所; 上海交通大学