大肠杆菌O78原生质体制备与再生的研究

作者：王春平; 韦强; 鲍国连; 崔言顺; 刘燕; 邵泽香; 季权安; 肖琛闻; 李建亮

来源：中国家禽, 2009, (07): 22-26.

• 大肠杆菌
• 原生质体
• 制备
• 再生 Esherichia coli
• protoplast
• formation
• regeneration

以耐药标记的鸭大肠杆菌ZBO78(Eryr,Chls)为亲本菌株,在DNaseⅠ始终存在的条件下,采用溶菌酶-EDTA法制备原生质体,然后在高渗琼脂平板上再生。通过优化溶菌酶-EDTA的工作浓度与作用时间、原生质体不同的处理方式和再生培养基中蔗糖浓度等条件,摸索出ZBO78以0.2g/L溶菌酶作用20min后补加EDTA至终浓度为0.01mmol/L继续作用16min为最佳试验条件,并成功获得了91.94%的原生质体制备率和37.29%的再生率,为下一步进行融合试验提供了依据。

• 出版日期2009
• 单位浙江省农业科学院; 山东农业大学