IgE高亲和力受体蛋白的制备及其生物功能的鉴定

作者：徐婷; 张强; 喻荷莲; 王世春; 徐小敏; 易中梅; 蒋天伦

来源：重庆医学, 2018, 47(09): 1161-1164.

• IgE高亲和力受体
• IgE抗体
• 抗FcεRIα自身抗体
• 酶联免疫吸附测定

目的通过基因工程技术制备人IgE抗体结合其高亲和力受体α段(FcεRIα)蛋白并对其生物学功能进行鉴定,为探讨FcεRIα在过敏性疾病中的作用奠定研究基础。方法应用基于PCR的精确合成法(PAS)方法获得人FcεRIα基因,构建原核表达载体pET-FcεRIα,低温诱导表达FcεRIα并采用His标签纯化重组蛋白;通过ELISA法鉴定重组人FcεRIα蛋白的生物功能。结果扩增出大小约为560bp的人FcεRIα基因;pET-FcεRIα质粒经双酶切及测序鉴定正确;诱导表达并纯化出相对分子质量大小约为22 000的人FcεRIα;重组人FcεRIα能有效检测人血清中的抗FcεRIα自身抗体水平,并且能够与人血清中IgE抗体高效结合。结论成功制备人FcεRIα蛋白,并初步具备检测人血清中抗FcεRIα自身抗体及IgE抗体的能力,为后续研究提供了有利的实践基础。

• 出版日期2018
• 单位西南医院; 中国人民解放军陆军军医大学