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摘要
目的 探究敲除泛素特异性蛋白酶13(USP13)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导下小鼠肝实质细胞凋亡的影响。方法 体外分离培养小鼠原代肝实质细胞，随后用TNF-α或TNF-α和环己酰亚胺（CHX）共刺激细胞。MTS法检测细胞活力、流式细胞术检测细胞凋亡、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测凋亡相关基因表达、胱天蛋白酶-3(caspase-3)凋亡试剂盒检测caspase-3的激活、Western印迹法检测核因子κB(NF-κB)和丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）信号通路活化。结果 敲除USP13的小鼠肝实质细胞在TNF-α和CHX共诱导下，细胞活力下降、凋亡增多。机制探究发现，在TNF-α和CHX共处理下，敲除USP13导致抗凋亡基因下调、促凋亡基因上调，以及caspase-3活化增强。在TNF-α单独处理下，敲除USP13导致NF-κB及MAPK信号通路活化受阻。结论 敲除USP13抑制肝实质细胞中NF-κB及MAPK信号通路活化，促进TNF-α诱导的细胞凋亡。
