脱氧雪腐镰刀菌烯醇的环七肽模拟表位筛选

作者：余鹃; 贾彦琼; 骆敏儿; 王宏

来源：食品工业科技, 2017, 38(24): 133-147.

DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2017.24.026

• 脱氧雪腐镰刀菌烯醇
• 噬菌体展示技术
• 模拟表位

利用噬菌体随机环七肽库筛选脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)模拟表位。以DON单抗为靶分子,四轮固相淘选噬菌体随机环七肽库,筛选出阳性噬菌体,并通过ELISA实验检测其特异性。对阳性克隆的DNA进行测序,取序列不同的阳性克隆,分别建立阳性噬菌体与DON标准品的竞争抑制曲线。对30个噬菌体单克隆进行活性测定,结果显示能与DON单抗结合的噬菌体克隆有28株,其中的22株能被DON标准品阻断与DON单抗结合。DNA测序结果显示,21株阳性噬菌体的序列是PFPNHPY,另一株的序列是TPWTQHL。其相应噬菌体与DON毒素标准品的竞争曲线结果显示,8号噬菌体建立的竞争抑制曲线线性范围是0.02920.636μg/mL,IC50为0.169μg/mL;4号噬菌体建立的竞争抑制曲线线性范围是0.01240.271μg/mL,IC50为0.058μg/mL。在随机环七肽库中筛选到TPWTQHL和PFPNHPY两个DON模拟表位,可替代DON毒素标准品,建立DON的免疫学无毒检测技术。

• 出版日期2017
• 单位暨南大学