蜘蛛毒素基因(ω-ACTX-Hv2a)的人工合成及定点突变

作者：易小平; 邓柳红; 张春发

来源：热带作物学报, 2008, (01): 53-57.

DOI：10.3969/j.issn.1000-2561.2008.01.011

• 蜘蛛毒素基因(ω-ACTX-Hv2a)
• 基因合成
• 基因突变

蜘蛛毒素(ω-ACTX-Hv2a)是最理想研制成为无公害杀虫剂的昆虫毒素肽之一,但由于其cDNA至今还未被克隆出来;为了进行后续研究工作,笔者选用人工合成的办法进行基因克隆等工作。化学合成4对(A1-、A1+,A2-、A2+,H3-、H3+和H4-、H4+)单链寡核苷酸片段,然后,将片段A1-、A1+、A2-、A2+和片段H3-、H3+、H4-、H4+分别混合后退火连接,形成A和H片段,再将A和H片段在连接酶的作用下,合成全基因Hv2a。经测序可知,合成的Hv2a有5个碱基缺失;利用"循环延伸"的方法,经2次定点突变后,通过克隆测序证明Hv2a全基因序列完全正确,说明这种定点突变的方法是可行的。

• 出版日期2008
• 单位中国热带农业科学院热带生物技术研究所