凋亡素蛋白多克隆抗体的制备及免疫学评价

作者：王春晖; 王剑松; 王文举; 詹辉; 李鸿钧; 颜汝平; 徐鸿毅

来源：中国生物工程杂志, 2011, (07): 38-44.

DOI：10.13523/j.cb.20110707

• VP3蛋白
• 多克隆抗体
• 膀胱肿瘤
• 腺相关病毒 VP3 protein Polyclonal antibody Bladder neoplasms Adeno-associated virus

凋亡素由鸡贫血病毒中的VP3基因编码,能诱导多种肿瘤细胞发生凋亡。以真核表达载体pcDNA3.0-VP3为模板构建原核表达载体pET8a-VP3,经NdeⅠ/BamHⅠ双酶切鉴定和基因测序无误后,在IPGT诱导下表达VP3蛋白并对其进行纯化,将纯化后的VP3蛋白与弗氏完全佐剂或不完全佐剂乳化后,分别对两只新西兰大耳白兔进行皮下多点注射,间接ELISA检测免疫后血清效价,效价达到指标后第2天以心脏穿刺的方法采全血后分离抗血清。抗血清效价高的兔子进一步采用Protein A纯化总IgG,最终纯化后的抗体效价可以达到1∶243 000。用重组腺相关病毒rAAV-VP3感染细胞后对抗体的特异性进行免疫...

• 出版日期2011
• 单位中国医学科学院医学生物学研究所; 昆明医学院第二附属医院