摘要

背景:将生长因子加入支架材料能促进体外培养干细胞的增殖及成骨分化,促进骨组织再生。改良型富血小板纤维蛋白中含有多种生长因子,能够促进多种细胞的增殖活性及相关功能蛋白的表达。目的:观察改良型富血小板纤维蛋白、双相磷酸钙单独或联合使用对骨髓间充质干细胞生长状况的影响。方法:将第3代兔骨髓间充质干细胞分4组培养,分别加入基础培养基(空白组)、改良型富血小板纤维蛋白条件培养基(A-PRF组)、双相磷酸钙(BCP组)、改良型富血小板纤维蛋白条件培养基与双相磷酸钙(A-PRF+BCP组)。CCK-8法检测细胞增殖活性,甲基罗丹明-鬼笔环肽荧光染色观察细胞黏附情况,定量检测细胞内碱性磷酸酶活性及矿化结节形成情况。结果与结论:①A-PRF+BCP组培养3,5,7,11,14 d的细胞增殖吸光度值高于其他3组,A-PRF组培养1,3,5 d的细胞增殖吸光度值高于BCP组、空白组,BCP组培养7,11,14d的细胞增殖吸光度值高于A-PRF组、空白组;②甲基罗丹明-鬼笔环肽荧光染色显示,BCP组、A-PRF+BCP组骨髓间充质干细胞黏附在双相磷酸钙材料表面,并且A-PRF+BCP组细胞与微丝数量明显多于BCP组;③培养1,21,28 d的矿化结节合成情况为:A-PRF+BCP组>BCP组>A-PRF组>空白组;④培养5,7,9 d的细胞碱性磷酸酶含量为:A-PRF+BCP组>BCP组>A-PRF组>空白组,组间两两比较差异有显著性意义(P <0.05);⑤结果表明,双相磷酸钙前期促细胞增殖进作用较弱,但其支架作用良好,改良型富血小板纤维蛋白于前期促进细胞增殖作用明显,二者联合使用时对细胞的增殖分化均有良好促进作用。