一个黑曲霉细胞色素P450基因启动子的结构与表征

作者：高丽影; 马梅; 王艳梅; 寇航; 申玉玉; 路福平; 黎明^*

来源：天津科技大学学报, 2020, 35(06): 7-12.

DOI：10.13364/j.issn.1672-6510.20200114

• 黑曲霉
• 细胞色素P450启动子
• 启动子元件
• 荧光素酶

黑曲霉是工业生产上的重要模式菌株,其启动子活性对其生产效率有重要影响;细胞色素P450是调控菌体能量代谢、细胞生长和各种代谢产物合成的关键酶.通过对细胞色素P450基因启动子区域(PP450)的克隆、结构分析和功能鉴定,为P450基因的表达调节研究和P450启动子的应用提供基础.从黑曲霉基因组克隆出细胞色素P450基因(An11g01980)的上游片段PP450,连接到pGEM-T载体进行测序,用启动子分析网站GPMiner和EMBOSS分析PP450片段的启动子功能元件,结果显示:PP450片段的-864～-106 bp处有一段长为759 bp的CpG区域,含有2个TATA盒、6个CAAT盒、2个GC盒和1个可能的AmyR结合位点.构建含PP450启动子的启动子–报告基因表达载体p PZP-PP450并转化黑曲霉,通过荧光强度检测启动子功能,结果表明该启动子是一个组成型启动子,但添加沃氏氧化物后启动子表达强度明显增强,推测该启动子区域可能含有沃氏氧化物相关的反应元件或增强子.

• 出版日期2020
• 单位工业酶国家工程实验室; 生物工程学院; 工业发酵微生物教育部重点实验室; 天津科技大学