牛病毒性腹泻病毒NS3基因的序列分析、表达与抗原性鉴定

作者：李岩; 聂明非; 魏伟; 温凯; 贾莹; 霍慧; 王君伟

来源：生物工程学报, 2010, (03): 311-316.

DOI：10.13345/j.cjb.2010.03.016

• 牛病毒性腹泻病毒
• NS3蛋白
• 差异性分析
• 进化树
• 抗原性 bovine viral diarrhea virus
• NS3 protein
• divergence analysis
• phylogenetic tree
• antigenicity

本研究应用套式RT-PCR方法扩增出牛病毒性腹泻病毒VEDEVAC株编码NS3蛋白的基因,克隆至表达载体pET-30a( ),并进行测序。对瘟病毒属病毒NS3基因进行氨基酸差异性分析,显示平均P-distance为0.07,系统进化树分析表明VEDEVAC株隶属于BVDV1型。将构建成功的重组质粒转化大肠埃希氏菌Rosetta(DE3),在IPTG诱导下表达NS3重组蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化和尿素梯度透析后进行反应原性鉴定。Western blotting结果显示表达的重组蛋白可以与牛病毒性腹泻病毒阳性血清反应,并与猪瘟阳性血清有交叉反应,ELISA结果显示该重组蛋白具有良好的反应原性...

• 出版日期2010
• 单位东北农业大学