大豆球蛋白A1a酸性多肽的原核表达及纯化

作者：刘宾; 滕达; 杨雅麟; 王建华

来源：食品科学, 2011, (17): 278-282.

• 大豆球蛋白
• A1a酸性多肽
• 原核表达
• Western blotting glycinin
• A1a acidic peptide
• prokaryotic expression
• Western blotting

为建立大豆球蛋白免疫检测方法及致敏机理的深入研究提供基础材料,人工合成了大豆球蛋白A1a酸性多肽基因的cDNA序列,通过聚合酶链式反应(PCR)和Bam HI、Kpn I双酶切构建了原核表达载体pET30a-A1a,将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21后用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。SDS-PAGE分析表明,A1a酸性多肽融合蛋白能以可溶蛋白形式进行分泌表达,并且诱导5h后,A1a酸性多肽融合蛋白表达量达到最高。经His亲和层析纯化,获得纯度达90%的融合A1a蛋白,分子质量大小约为38kD。Western blotting显示,所获得的A1a融合蛋白能与对豆粕...

• 出版日期2011
• 单位中国农业科学院饲料研究所