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摘要
为研究低氧是否能促进小鼠卵泡颗粒细胞凋亡,将体外培养的小鼠卵泡颗粒细胞分成对照组和低氧处理组。对照组的细胞一直在常规的二氧化碳培养箱内培养,低氧处理组的细胞先在常规二氧化碳培养箱内培养一段时间后放入三气培养箱内(1%的氧气,5%的二氧化碳,94%的氮气)培养,一定时间后收集两组细胞样:用流式细胞仪结合Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡情况;用荧光定量PCR检测HIF1α及BNIP3基因在两组细胞中的mRNA转录水平;用TUNEL染色法检测两组细胞的DNA断裂情况;在小鼠颗粒细胞中过表达HIF1α,检测BNIP3基因的mRNA转录情况。结果表明:与对照组相比,低氧处理能够显著促进体外培养的小鼠卵泡颗粒细胞凋亡;低氧处理组HIF1α和BNIP3基因的mRNA转录水平显著高于对照组;低氧处理的小鼠卵泡颗粒细胞内有明显的核固缩现象,但DNA断裂多发生在胞质内;在小鼠颗粒细胞中过表达HIF1α能够引起BNIP3的mRNA转录水平升高。这些结果表明低氧处理能促进小鼠卵泡颗粒细胞的凋亡及细胞内HIF1α与BNIP3基因的表达量升高;由低氧处理后小鼠卵泡颗粒细胞内DNA断裂多发生在细胞质内,推测低氧引起小鼠颗粒细胞凋亡可能是通过线粒体凋亡途径实现的。
- 出版日期2016
- 单位动物科技学院; 南京农业大学
