口蹄疫病毒vp1基因的克隆与植物双元表达载体的构建

作者：王宝琴; 王小龙; 张永光; 潘丽; 王文秀

来源：中国预防兽医学报, 2007, (03): 166-169.

• 口蹄疫病毒
• vp1基因
• 克隆
• 三亲融合
• 双元表达载体
• 根癌农杆菌 foot-and-mouth disease virus
• vp1 gene
• cloning
• triparental mating
• binary expression vector
• agrobacterium tumefacien

通过RT-PCR法获得阿克苏(Akesu/O/58)FMDV结构蛋白基因vp1,将该基因克隆到pGEM-T Easy载体进行核苷酸序列测定。将vp1基因、Kozak序列等插入中间表达质粒pBin438,构建重组中间表达载体pBinVP1。采用三亲融合法构建植物双元表达载体pBinFMDV-VP1。结果表明:vp1基因为639bp。重组中间表达载体pBinVP1经BamHⅠ/SalⅠ双酶切、PCR扩增和序列测定,表明vp1基因、Kozak序列等插入pBinVP1中。在含50mg/L卡那霉素、25mg/L链霉素和50mg/L利福平的YEB培养基上筛选及对融合农杆菌质粒进行vp1基因的PCR检测,证...

• 出版日期2007
• 单位中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 南京农业大学