摘要

目的探讨构建过氧化氢(H2O2)诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的方法。方法不同浓度H2O2处理人卵巢颗粒细胞COV434,采用Western blot检测Caspase-3表达,流式细胞仪和DAPI/TUNEL双染色法检测细胞凋亡情况,H2DCF-DA检测细胞内活性氧族(ROS)水平,通过量效关系和时效关系来确定H2O2的最佳作用条件。结果 11.5 mmol/L浓度H2O2处理COV434细胞24h后Caspase-3表达量升高最明显。随着H2O2浓度增加及作用时间的延长细胞凋亡率不断升高。细胞内ROS水平随着H2O2浓度的增加而增加。1.5mmol/L浓度H2O2处理1h后细胞内ROS水平上升最明显。结论 H2O2诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的最适宜浓度为11.5 mmol/L,采用细胞凋亡情况评价作用时间是24h,采用ROS评价作用时间为1h。

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