大鼠脊髓源神经干细胞胶质细胞源性神经营养因子基因转染实验研究

作者：高明勇; 郑启新; 肖建德; 李振宇; 郭晓东; 闫洪印

来源：中华实验外科杂志, 2005, 22(04): 474-476.

DOI：10.3760/j.issn:1001-9030.2005.04.034

• 脊髓
• 神经干细胞
• 基因工程
• GDNF

目的　构建表达外源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的脊髓源基因工程神经干细胞。方法　体外分离纯化,扩增大鼠脊髓源神经干细胞,培养、诱导分化结果采用Nestin、NF 2 0 0、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组织化学鉴定;用自行构建的大鼠胶质细胞源性神经营养因子真核表达质粒转染神经干细胞,用荧光检测及GDNF免疫组织化学染色予以证实,转基因GDNF表达采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法定量分析。结果　体外纯化获得大量脊髓源神经干细胞,在血清诱导下能分化为神经元和神经胶质细胞;转基因神经干细胞能稳定表达GDNF ,在随后3周内,转基因神经球能持续表达外源性GDNF蛋白,表达量稳定在(93 .0±6.5 )ng/L左右。结论　胚胎脊髓源神经干细胞体外培养能保持干细胞生物学特点,转染GDNF后神经干细胞能稳定表达外源GDNF蛋白,为后续转基因治疗中枢神经系统疾病研究奠定了基础

• 出版日期2005
• 单位深圳市第二人民医院; 华中科技大学同济医学院附属协和医院