摘要

齐口裂腹鱼(Schizothoraxprenanti)是长江上游水域的珍稀鱼类,近年来由于环境变化和疾病爆发野外齐口裂腹鱼数量急剧减少,现已被列入长江上游二级急切保护的特有鱼类,因此,对齐口裂腹鱼的保护刻不容缓。建立齐口裂腹鱼细胞系是保护其种质资源的有效手段,也可以在不伤害现有鱼群的条件下进行多种齐口裂腹鱼相关生物学研究。本研究建立了首个来源于齐口裂腹鱼的细胞系, SPG细胞系。原代细胞分离自齐口裂腹鱼鳃丝组织,呈均一的上皮状,使用含15%血清的L-15培养,在15个月时间里成功传至55代。线粒体COI基因鉴定,证明该细胞来源于齐口裂腹鱼,核型检测细胞染色体数目为2n=96。在液氮中保存12个月的细胞,复苏后能保持75%以上活力。EGFP-N3质粒转染SPG细胞后观察到明显的绿色荧光蛋白表达。病毒类似物poly(I:C)和大肠杆菌脂多糖LPS可引起细胞IL-1β、IL-8、TNFa和TLR22等免疫相关基因表达量升高。表明本研究建立的齐口裂腹鱼鳃丝细胞系可用于免疫学研究。此外,此细胞系还将在种质保存,外源蛋白表达和齐口裂腹鱼体外生物学研究中发挥重要作用。