腺病毒介导靶向碱性成纤维细胞生长因子siRNA载体的构建及鉴定

作者：刘家美; 刘俊; 冯学泉; 徐新女; 刘宏胜; 张飚; 吴静超; 王金环

来源：肿瘤防治研究, 2014, (11): 1186-1189.

• 碱性成纤维细胞生长因子
• 腺病毒
• 载体
• 小分子干扰RNA bFGF
• Adenovirus
• Vector
• Small interfering RNA(siRNA)

目的构建一种高效"沉默"碱性成纤维细胞生长因子的小干扰RNA重组腺病毒载体,并为该载体在基因研究中提供相关资料。方法设计、合成优选的靶向bFGF特异性siRNA序列。采用限制性内切酶消化和T4 DNA连接酶连接的方法,将bFGF-siRNA序列克隆至腺病毒穿梭质粒pGStrack上,然后将重组穿梭质粒pGStrack-bFGF-siRNA和腺病毒骨架质粒pGSadeno体外LR位点进行特异性重组,将bFGF-siRNA基因转移至腺病毒骨架质粒pGSadeno上,最后重组骨架质粒pGSadeno-bFGF-siRNA。鉴定正确后经Pac Ⅰ酶切,转染HEK 293细胞,包装成重组腺病毒rAd5-...

• 出版日期2014
• 单位天津市第四中心医院; 天津市环湖医院; 天津市第一中心医院