摘要

鼠灰色(Agouti)基因时影响动物毛色的重要基因之一,虽然在多种动物中发现了Agouti基因的存在和表达,但Agouti信号蛋白(Agouti signaling protein,ASIP)对羊驼(Lama pacos)黑色素细胞的增殖及对毛色相关基因的影响研究鲜见报道。本研究旨在利用不同浓度ASIP-YY(a C-terminal fragment of ASIP)作用于体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞,观察其对黑色素细胞及黑色素生成的影响。不同浓度ASIP-YY(0.0、0.1、1.0、10.0、100.0 nmol/L)处理羊驼皮肤黑色素细胞72 h。四甲基偶氮噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测黑色素细胞活力,紫外分光光度法检测黑色素含量,q RT-PCR检测酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)、TRP-1、TRP-2、黑色素细胞膜上的黑色素皮质激素受体1(melanocortin-1 receptor,MC1R)和小眼畸形相关转录因子(Micropht-halmiaassocitated transcription factor,MITF)m RNA表达量。结果显示,黑色素细胞活力受到抑制;ASIP-YY在0.1、10.0、100.0 nmol/L时对TYR m RNA的表达极显著抑制(P<0.01),10.0、100.0 nmol/L时对TRP-1 m RNA的表达极显著抑制(P<0.01),10.0 nmol/L时对MC1R m RNA的表达显著抑制(P<0.05),0.1、1.0、10.0 nmol/L时对MITF m RNA的表达极显著抑制(P<0.01);0.1、1.0 nmol/L时对TRP-1、TRP-2 m RNA的表达显著提高(P<0.05),1.0、100.0 nmol/L时对MC1R的表达极显著提高(P<0.01)。ASIP-YY可使黑色素细胞体积变小,抑制黑色素相关基因的表达,可能是ASIPYY竞争性的与MC1R结合,从而抑制黑色素相关基因的表达。本实验为进一步研究ASIP对羊驼皮肤黑色素生成调控提供一定的理论基础。