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摘要
为构建表达胸腺肽和鸡γ干扰素（Tα1-cIFN-γ）融合蛋白的重组乳酸乳球菌并检测其作为口服免疫增强剂对外周血单个核细胞增殖活性及鸡肠道菌群的影响。本研究构建了表达rTα1-cIFN-γ的食品级乳酸菌表达菌株r-L. lactis-Tα1-cIFN-γ，经Western blot检测显示，目的蛋白稳定表达于胞质，蛋白大小正确。以重组乳酸菌裂解液（含重组蛋白40μg/mL，约合重组菌2×109）口服3周龄SPF鸡。采用CCK-8方法检测鸡外周血单个核细胞检测增殖活性，结果显示，在首免2、4、7周后鸡外周血单个核细胞（PBMCs）增殖活性均极其显著高于空白对照组（P<0.0001）;7周后采用16S rRNA高通量测序方法检测分析SPF鸡盲肠菌群结构变化。鸡肠道菌群16S分析结果显示，口服重组乳酸菌r-L. lactis-Tα1-cIFN-γ显著改善了盲肠肠道菌群结构和组成，其中乳酸杆菌属（Lactobacillus）、普拉梭菌（Faecalibacterium prausnitzii）和黏液真杆菌属（Blautia）等有益菌群极显著增加；而瘤胃菌属（Ruminococcaceae＿UCG-014X），另枝菌属（Alistipes）等机会致病菌属显著减少。上述结果首次表明，口服rL. lactis-Tα1-cIFN-γ不仅显著提高了鸡PBMCs的增殖活性，提高了机体的天然免疫力，而且口服重组乳酸菌还可以改善肠道菌群结构和组成，提高有益菌属的含量，可通过肠道菌群间接提高动物的天然免疫力。本研究为天然绿色新型口服免疫增强剂或免疫佐剂的研制奠定了基础。
- 出版日期2023
- 单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 动物科技学院; 石河子大学
