油脂形成期棉花种子全长cDNA文库的构建

作者：王德龙; 于霁雯; 喻树迅; 翟红红; 范术丽; 宋美珍; 张金发

来源：棉花学报, 2009, (05): 351-355.

• 棉花
• 胚
• 油脂
• cDNA文库
• EST cotton
• embryo
• lipid
• cDNA library
• EST

提取海岛棉7124开花后25~35 d胚的总RNA,利用SMART技术,经21轮LD-PCR扩增获得全长双链cDNA,经SfiⅠ酶切、层析柱分离后,收集500 bp以上的片段与pDNR-Lib载体连接并转化到感受态DH10B细胞,构建了棉花种子全长cDNA文库。所构建的原始文库库容为5×106,文库滴度为1.5×108cfu.mL-1。在文库中随机挑取180个克隆进行PCR检测,结果显示,文库中插入片段长度为0.5~2.5 kb,将挑取的180个单克隆进行EST测序,无空载序列,说明文库重组率为100%;序列分析结果表明,其中与油脂形成相关的EST有13条。以上数据说明构建的文库质量较高,为进...

• 出版日期2009
• 单位中国农业科学院棉花研究所